非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
肌球蛋白 Va 抗体 (G-4): sc-365986. C32 全细胞裂解液中肌球蛋白 Va 表达的近红外 Western 印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂阻断: sc-516214. 所用检测试剂: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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Myosin Va CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402108
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Myosin Va CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Myosin Va基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Myosin Va: sc-365986，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Myosin Va CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402108 | 20 µg | $397.00 |
概述
MYO5A 编码肌球蛋白 Va（myosin Va），这是一种以肌动蛋白为轨道的运动蛋白，负责沿细胞皮层肌动蛋白网络对膜性细胞器和蛋白复合物进行长距离运输。肌球蛋白 Va 与 Rab GTP 酶及衔接蛋白协同作用，调控囊泡运输、内吞回收、分泌颗粒动力学，以及在神经元、黑色素细胞和免疫细胞中对货物的极性递送。这些过程影响突触功能、黑素体分布和细胞极化，因此当 MYO5A 功能受损时，常与神经系统和色素相关表型相联系。在人源细胞模型中，肌球蛋白 Va 依赖的运输发生改变，还可能影响与疾病相关的区室化信号传导及细胞骨架组织，从而导致细胞功能障碍。
Myosin Va CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MYO5A基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对MYO5A基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏MYO5A开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Myosin Va蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建MYO5A缺失的细胞模型，用于Myosin Va信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Myosin Va 功能至关重要的 MYO5A 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 MYO5A 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Myosin Va CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Myosin Va CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MYO5A 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Myosin Va HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Myosin Va HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由MYO5A同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MYO5A靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。