Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Myosin Ib Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403530
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Myosin Ib O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Myosin Ib, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Myosin Ib Anticorpo (F-8): sc-393053
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Myosin Ib Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403530 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MYO1B codifica a miosina Ib, um motor dependente de actina associado à membrana que contribui para a tensão cortical e para a remodelação dinâmica da membrana plasmática. A miosina Ib participa no tráfego endocítico, na formação de ruffles (ondulações) de membrana e na organização da rede de actina, ao acoplar a geração de força a membranas ricas em fosfoinositídeos. Por meio dessas funções, influencia a polaridade celular, a adesão e a migração, processos que se intersectam com vias de sinalização que regulam a dinâmica do citoesqueleto e o transporte vesicular. Alterações na expressão ou na atividade de MYO1B têm sido investigadas em contextos de comportamento celular invasivo e de arquitetura epitelial desregulada, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos da remodelação do córtex de actina associada a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Myosin Ib (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYO1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYO1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYO1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Myosin Ib.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYO1B para a investigação da sinalização de Myosin Ib, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYO1B críticos para a função Myosin Ib
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYO1B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Myosin Ib Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Myosin Ib Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYO1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Myosin Ib Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Myosin Ib (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYO1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYO1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.