Plásmido CRISPR de Activación (h) myogenin: sc-400176-ACT

El gen humano **MYOG** codifica la **miogenina**, un factor de transcripción de tipo hélice-bucle-hélice básico (bHLH) que actúa como regulador central de la diferenciación del músculo esquelético y de la maduración de las fibras musculares. La miogenina coordina programas de expresión génica miogénica al asociarse con proteínas E y unirse a elementos E-box para promover la salida del ciclo celular, la fusión de mioblastos y la producción de proteínas sarcoméricas dentro de la red reguladora miogénica. Su actividad se integra con vías que determinan el compromiso de linaje y la dinámica de diferenciación, incluidas señales como Notch y Wnt que modulan la miogénesis. La expresión desregulada de **MYOG** o los circuitos transcripcionales miogénicos es relevante en estudios sobre regeneración muscular deficiente, fenotipos de desgaste muscular y contextos tumorales con firmas de diferenciación miogénica aberrantes.

myogenin El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de MYOG sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

myogenin El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus MYOG en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional MYOG, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de myogenin. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo MYOG y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de myogenin en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía myogenin en células tumorales con expresión de MYOG silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.