MyoD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400092-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MyoDO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MyoD (h) e o Plasmídeo Double Nickase MyoD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MYOD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MyoD Anticorpo (E-1): sc-377186
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MyoD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400092-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MyoD Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400092-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYOD1 codifica o MyoD, um fator de transcrição básico do tipo hélice–alça–hélice (bHLH) que atua como regulador mestre da miogênese esquelética ao se ligar a motivos E-box e coordenar o remodelamento da cromatina com a expressão de genes específicos de linhagem. O MyoD integra sinais de redes de fatores reguladores miogênicos e interage com as vias de sinalização Notch, Wnt/β-catenina, TGF-β e MAPK para equilibrar a proliferação de progenitores e a diferenciação. Por meio de interações cooperativas e antagônicas com fatores como MYOG, MEF2 e proteínas ID, ele promove o comprometimento de mioblastos, a saída do ciclo celular e programas de genes estruturais do músculo. A desregulação da atividade de MYOD1 é relevante para a biologia da regeneração muscular prejudicada e de doenças neuromusculares, e alterações em MYOD1 são estudadas no contexto de tumores miogênicos e da plasticidade de linhagem.
MyoD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MYOD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MYOD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MYOD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MYOD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.