MYL9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401577

Descripción general

MYL9 codifica la cadena ligera de miosina 9, una cadena ligera reguladora que modula la contractilidad actina–miosina al controlar la actividad motora de la miosina II. Su estado de fosforilación integra la señalización a través de la quinasa de la cadena ligera de miosina dependiente de Ca²⁺/calmodulina y de las vías RhoA–ROCK para regular la formación de fibras de estrés, la dinámica de las adhesiones focales y los cambios en la forma celular. MYL9 contribuye a la contracción del músculo liso, así como a procesos no musculares, entre ellos la citocinesis, la migración celular y las respuestas contráctiles del endotelio o de los fibroblastos. La contractilidad y la remodelación del citoesqueleto vinculadas a MYL9 cuando se desregulan se han asociado con alteraciones del tono vascular, fibrosis tisular y comportamientos celulares invasivos relevantes para la biología del cáncer.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MYL9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYL9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYL9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYL9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MYL9.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYL9 para la investigación de la señalización de MYL9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MYL9 críticos para la función de MYL9
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYL9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MYL9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MYL9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYL9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MYL9 (h) y el plásmido HDR MYL9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYL9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYL9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.