Plasmide Double Nickase (h) MYH4: sc-400467-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MYH4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MYH4 Double Nickase (h) et le plasmide MYH4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MYH4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MYH4 | sc-400467-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MYH4 | sc-400467-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYH4 code la chaîne lourde de myosine 4, une protéine motrice contractile du muscle squelettique à contraction rapide qui constitue l’ossature des filaments épais et convertit l’hydrolyse de l’ATP en génération de force le long de l’actine. Son interaction régulée avec les chaînes légères de myosine et les protéines structurales sarcomériques soutient le cycle des ponts actine-myosine, l’organisation des myofibrilles et une contractilité spécifique au type de fibre musculaire. L’expression de MYH4 contribue à des voies contrôlant l’assemblage du sarcomère, le couplage excitation–contraction et la spécialisation métabolique des fibres rapides glycolytiques. Une composition dérégulée des chaînes lourdes de myosine et l’intégrité sarcomérique sont pertinentes pour l’étude de la faiblesse du muscle squelettique, du remodelage et des phénotypes myopathiques dans des systèmes humains.
MYH4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MYH4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MYH4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MYH4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MYH4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.