MYEOV2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409378

Descripción general

COPS9 codifica un componente central del signalosoma COP9, un complejo multiproteico que regula las ligasas de ubiquitina tipo cullina-RING al controlar el estado de neddilación de las cullinas. Mediante esta actividad, COPS9 influye en la proteostasis dependiente de ubiquitina, la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y las vías de transducción de señales que gobiernan la proliferación y la diferenciación. La alteración de la función del signalosoma COP9 puede modificar el recambio de proteínas reguladoras clave y reconfigurar programas de estrés y de desarrollo. La regulación aberrante de estos procesos se ha asociado con fenotipos oncogénicos y otros trastornos vinculados a un desequilibrio de la vía de la ubiquitina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MYEOV2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen COPS9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del COPS9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de COPS9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MYEOV2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en COPS9 para la investigación de la señalización de MYEOV2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de COPS9 críticos para la función de MYEOV2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de COPS9 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MYEOV2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MYEOV2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus COPS9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MYEOV2 (h) y el plásmido HDR MYEOV2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología COPS9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana COPS9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.