Plasmide Double Nickase (m) MyD88: sc-421774-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MyD88 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MyD88 Double Nickase (m) et le plasmide MyD88 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Myd88. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MyD88 Antibody (E-11): sc-74532
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MyD88 | sc-421774-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MyD88 | sc-421774-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Myd88* code la protéine de réponse primaire de différenciation myéloïde 88 (MyD88), un adaptateur essentiel pour la plupart des récepteurs de type Toll et des membres de la famille des récepteurs de l’interleukine‑1, qui couple l’engagement du récepteur à la signalisation IRAK–TRAF6, à l’activation de NF‑κB et à l’expression de gènes inflammatoires induite par les MAPK. La signalisation dépendante de MyD88 coordonne l’activation des cellules immunitaires innées, la production de cytokines et les réponses antimicrobiennes, tout en façonnant l’immunité adaptative en aval. Les voies MyD88 dérégulées sont largement utilisées pour modéliser une signalisation inflammatoire aberrante en biologie des infections et dans les mécanismes des maladies inflammatoires, et pour étudier comment les signaux de l’immunité innée influencent l’homéostasie tissulaire et les interactions tumeur–système immunitaire.
MyD88 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Myd88 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Myd88. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Myd88. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Myd88.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.