musculin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403242
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- musculin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico musculin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: musculin Anticuerpo (4D7): sc-293482
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
musculin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403242 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MSC codifica musculin, un factor de transcripción de tipo hélice–bucle–hélice básica (bHLH) que modula programas de expresión génica que especifican linajes al unirse a motivos E-box y cooperar con otros reguladores bHLH. Musculin está implicada en el control de decisiones de destino celular, la temporalidad de la diferenciación y la dinámica de represión/activación transcripcional en contextos del desarrollo y específicos de tejido, con efectos posteriores sobre la proliferación y la estabilidad fenotípica. Se ha informado de una expresión alterada de MSC en múltiples escenarios relevantes para enfermedades, incluido el reprogramado transcripcional asociado al cáncer y cambios en el estado de diferenciación, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar redes de regulación génica. El análisis funcional de musculin ayuda a aclarar cómo los circuitos impulsados por bHLH interactúan con vías que gobiernan el control del crecimiento y la identidad celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO musculin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MSC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MSC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MSC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína musculin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MSC para la investigación de la señalización de musculin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MSC críticos para la función de musculin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MSC para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido musculin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido musculin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MSC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR musculin (h) y el plásmido HDR musculin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MSC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MSC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.