Plasmide Double Nickase (h) Mucin 4/MUC4: sc-400329-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mucin 4/MUC4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mucin 4/MUC4 Double Nickase (h) et le plasmide Mucin 4/MUC4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MUC4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Mucin 4/MUC4 Antibody (1G8): sc-33654
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mucin 4/MUC4 | sc-400329-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Mucin 4/MUC4 | sc-400329-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC4 code la mucine 4, une glycoprotéine de haut poids moléculaire associée à la membrane, qui contribue à la fonction de barrière épithéliale, à la lubrification et à la formation du glycocalyx grâce à une O‑glycosylation étendue. En tant que mucine de surface cellulaire, MUC4 participe aux interactions cellule–cellule et cellule–matrice et peut moduler les réseaux de signalisation des récepteurs, notamment les voies associées à la famille ERBB, influençant la prolifération, la différenciation et les réponses au stress. Les altérations de l’expression de MUC4 et le remodelage de ses glycoformes sont fréquemment étudiés dans le contexte de la transformation épithéliale, de phénotypes liés à l’invasion et de mécanismes d’échappement immunitaire aux interfaces muqueuses. Ces caractéristiques font de MUC4 un marqueur utile et un nœud fonctionnel pour étudier la biologie des mucines, l’homéostasie épithéliale et la communication croisée des voies de signalisation dans des modèles pertinents pour les maladies.
Mucin 4/MUC4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MUC4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MUC4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MUC4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MUC4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.