Mucin 2/MUC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400221-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mucin 2/MUC2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Mucin 2/MUC2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Mucin 2/MUC2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MUC2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mucin 2/MUC2 Anticorpo (F-2): sc-515032
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mucin 2/MUC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400221-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mucin 2/MUC2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400221-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC2 codifica a mucina 2, uma mucina secretada formadora de gel que é um dos principais componentes estruturais da barreira de muco intestinal e um determinante-chave da hidratação e lubrificação da superfície epitelial. Por meio de extensa O-glicosilação e polimerização, a MUC2 contribui para a defesa mucosa, regula a separação espacial entre hospedeiro e microbiota e sustenta a homeostase epitelial no trato gastrointestinal. Sua expressão e processamento se relacionam com programas de diferenciação de células caliciformes, com a função da via secretora do RE/Golgi e com a montagem da rede de mucinas. A desregulação da abundância de MUC2 ou das propriedades da barreira de mucina é frequentemente investigada na doença inflamatória intestinal, na inflamação associada à colite e em contextos de estresse epitelial relevantes para a biologia de tumores colorretais.
Mucin 2/MUC2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MUC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MUC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MUC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MUC2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.