Mucin 12/MUC12 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400505-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mucin 12/MUC12O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Mucin 12/MUC12 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Mucin 12/MUC12 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MUC12. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mucin 12/MUC12 Anticorpo (B-9): sc-377269
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mucin 12/MUC12 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400505-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mucin 12/MUC12 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400505-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC12 codifica a mucina 12, uma mucina associada à membrana, enriquecida em superfícies epiteliais, onde seu domínio extracelular fortemente O-glicosilado contribui para o glicocálix protetor, a integridade da barreira e as interações célula–célula. Por meio de efeitos na arquitetura da membrana apical e de crosstalk de sinalização dependente de mucinas, MUC12 pode influenciar programas de diferenciação epitelial, dinâmicas de adesão e respostas a estímulos inflamatórios. Padrões alterados de expressão de mucinas, incluindo a desregulação de MUC12, são frequentemente estudados no contexto de remodelamento epitelial, inflamação crônica e biologia de doenças gastrointestinais. Como uma glicoproteína de superfície com ampla modificação por glicanos, MUC12 também é relevante para investigações de vias de glicosilação e de como a composição do glicocálix modula a homeostase tecidual.
Mucin 12/MUC12 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MUC12 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MUC12. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MUC12. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MUC12 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.