MSMP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418716

Descripción general

MSMP (microseminoproteína beta) codifica una pequeña proteína secretada con expresión enriquecida en el epitelio prostático y detectable en fluidos extracelulares, lo que respalda un papel en la señalización paracrina local dentro del tracto reproductor masculino. Aunque sus interacciones precisas con receptores aún no están completamente definidas, MSMP se ha asociado con la regulación de la diferenciación epitelial, la homeostasis secretora y la comunicación tumor–estroma, procesos que se solapan con programas transcripcionales sensibles a andrógenos. Se han descrito cambios en la expresión de MSMP en distintos subtipos moleculares de cáncer de próstata y con frecuencia se estudia junto con vías de inflamación y remodelación del microambiente que influyen en la progresión. Estas características hacen de MSMP un marcador útil y un nodo funcional para investigar la biología de factores secretados en modelos derivados de próstata.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MSMP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MSMP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MSMP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MSMP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MSMP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MSMP para la investigación de la señalización de MSMP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MSMP críticos para la función de MSMP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MSMP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MSMP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MSMP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MSMP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MSMP (h) y el plásmido HDR MSMP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MSMP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MSMP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.