MS4A7 Plasmide Double Nickase (m): sc-430914-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MS4A7 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MS4A7 Double Nickase Plasmid (m) e il MS4A7 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ms4a7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MS4A7 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430914-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ms4a7 codifica MS4A7, una proteina di membrana tetraspan arricchita in monociti e macrofagi e frequentemente utilizzata come marcatore della differenziazione mieloide. MS4A7 è implicata nell’organizzazione dei microdomini della membrana plasmatica e nella regolazione della segnalazione dei recettori immunitari, influenzando processi quali fagocitosi, migrazione e attivazione infiammatoria. Nei tessuti murini e nei microambienti tumorali, l’espressione di Ms4a7 correla con l’infiltrazione dei macrofagi e con la polarizzazione funzionale, collegandola a reti dell’immunità innata che includono la segnalazione di citochine e chemochine. Stati mieloidi alterati caratterizzati da MS4A7 sono stati associati a patologie infiammatorie e alla biologia dei macrofagi associati al cancro, rendendo Ms4a7 un nodo utile per analizzare i programmi delle cellule immunitarie.
MS4A7 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ms4a7 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ms4a7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ms4a7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ms4a7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.