MRP2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419711

개요

Abcc2는 ATP 결합 카세트(ABC) 수송체인 MRP2(ABCC2)를 암호화하며, MRP2는 세포막에 존재하는 유출(배출) 펌프로서 내인성 대사산물 및 외인성 물질(xenobiotics)의 글루타티온, 글루쿠로니드, 황산염 포합체를 세포 밖으로 수송합니다. 생쥐에서 MRP2는 ATP 가수분해를 유기 음이온(빌리루빈 포합체 및 기타 2상 대사산물 포함)의 수송과 결합시켜 세포 해독과 산화환원 항상성을 유지하는 데 기여합니다. 또한 그 활성은 간 및 신장의 제거(클리어런스) 경로와 맞물려 있으며, 조절된 막 수송(트래피킹)과 담관막/정단막(canalicular/apical) 국소화를 통해 극성 상피에서의 장벽 기능에도 관여합니다. ABCC2/MRP2 기능 변화는 모델 시스템에서 담즙정체성(콜레스테이시스) 표현형, 고빌리루빈혈증 관련 생물학, 그리고 다약제 내성 기전의 맥락에서 흔히 연구됩니다.

MRP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Abcc2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Abcc2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Abcc2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MRP2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MRP2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Abcc2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MRP2 기능에 중요한 Abcc2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Abcc2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MRP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MRP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Abcc2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MRP2 HDR 플라스미드 (m) 및 MRP2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Abcc2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Abcc2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.