Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MRE11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401510
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRE11 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MRE11, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRE11 Anticorpo (18): sc-135992
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRE11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401510 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O MRE11 codifica uma nuclease que forma o complexo MRN com RAD50 e NBN para detetar quebras de dupla fita no DNA e coordenar a sinalização do checkpoint dependente de ATM. Por meio de atividades de exonuclease 3′–5′ e endonuclease, o MRE11 promove a resseção das extremidades do DNA, direcionando a reparação para a recombinação homóloga, e estabiliza forquilhas de replicação estagnadas durante o stress replicativo. Este papel na manutenção do genoma liga o MRE11 à homeostase dos telómeros, à recombinação meiótica e à supressão de rearranjos cromossómicos. A desregulação da função do complexo MRN está associada a fenótipos de instabilidade genómica e tem sido estudada no contexto da biologia do cancro e de doenças hereditárias de reparação do DNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MRE11 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MRE11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MRE11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MRE11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MRE11.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MRE11 para a investigação da sinalização de MRE11, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MRE11 críticos para a função MRE11
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MRE11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MRE11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MRE11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MRE11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MRE11 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MRE11 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MRE11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MRE11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.