Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
MRE11 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401510
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MRE11 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico MRE11, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MRE11 Antibody (18): sc-135992
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MRE11 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401510 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
MRE11 codifica una nucleasi che, insieme a RAD50 e NBN, forma il complesso MRN per rilevare le rotture a doppio filamento del DNA e coordinare la segnalazione del checkpoint dipendente da ATM. Attraverso attività esonucleasica 3′–5′ ed endonucleasica, MRE11 promuove la resezione delle estremità del DNA, indirizzando la riparazione verso la ricombinazione omologa e stabilizzando le forcelle di replicazione bloccate durante lo stress replicativo. Questo ruolo nel mantenimento del genoma collega MRE11 all’omeostasi dei telomeri, alla ricombinazione meiotica e alla soppressione dei riarrangiamenti cromosomici. La disregolazione della funzione del complesso MRN è associata a fenotipi di instabilità genomica ed è stata studiata nel contesto della biologia del cancro e dei disordini ereditari della riparazione del DNA.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MRE11 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MRE11 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MRE11 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MRE11 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MRE11.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MRE11 per lo studio della segnalazione di MRE11, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni MRE11 critici per la funzione di MRE11
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MRE11 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal MRE11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MRE11 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MRE11. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal MRE11 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MRE11 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MRE11 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MRE11 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.