mPRε Lentiviral Activation Particles (m2): sc-429117-LAC-2

Das Mausgen *Paqr9* kodiert den membranständigen Progesteronrezeptor Epsilon (mPRε), ein zur PAQR‑Familie gehörendes Sieben‑Transmembran‑Protein, das an schneller, nichtgenomischer Progesteron‑Signalübertragung an der Plasmamembran beteiligt ist. Es wird angenommen, dass mPRε GPCR‑ähnliche Second‑Messenger‑Kaskaden moduliert, darunter die Regulation von cAMP sowie der intrazellulären Kalziumdynamik, und dadurch zelluläre Signalprogramme beeinflusst, die mit der Steroidhormon‑Antwort zusammenhängen. Die *Paqr9*-Expression wird mit neuroendokriner und reproduktionsphysiologischer Funktion in Verbindung gebracht, und veränderte progesteronbezogene Signalwege sind relevant für Studien zu Fertilität, zur Regulation der Stressachse und zur Biologie hormonabhängiger Tumoren. Das Gene Editing von *Paqr9* in Mausmodellen ermöglicht eine mechanistische Aufklärung membraninitiierter Steroid‑Signalwege, des Rezeptor‑Crosstalks mit der Signalgebung des nukleären Progesteronrezeptors sowie nachgeschalteter transkriptioneller und metabolischer Anpassungen in definierten Geweben oder Zelltypen.

mPRε Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Paqr9-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

mPRε Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Paqr9-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen mPRε-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Paqr9-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.