Plasmide Double Nickase (m) Mox1: sc-433531-NIC

Le gène murin **Nox1** code l’isoforme de la NADPH oxydase **NOX1** (également appelée **Mox1**), une enzyme associée à la membrane qui génère des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et façonne la signalisation dépendante de l’état rédox. Les oxydants dérivés de NOX1 modulent des voies liées à la prolifération, à la migration, au remodelage du cytosquelette et à des programmes transcriptionnels inflammatoires, notamment les voies **MAPK** et **NF-κB**, avec des effets sur la biologie des cellules épithéliales et vasculaires. Dans des modèles expérimentaux, une activité de NOX1 altérée est fréquemment associée à des phénotypes de stress oxydant ainsi qu’à des modifications des fonctions de défense de l’hôte et de barrière. Ces propriétés font de **Nox1** une cible utile pour disséquer la transduction des signaux régulée par les ROS et le contrôle rédox de l’expression génique.

Mox1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nox1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nox1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nox1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nox1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.