Plasmide CRISPR/Cas9 KO MOS (h): sc-406911

Présentation

Le gène humain **MOS** code Mos, une protéine kinase sérine/thréonine surtout connue pour son rôle dans le contrôle du cycle cellulaire méiotique via l’activation de la cascade **MAPK/ERK**. Mos agit en amont de **MEK1/2** et **ERK1/2**, contribuant à coordonner l’activité du facteur cytostatique, la dynamique du fuseau et la progression à travers la phase M dans les cellules germinales, et il a servi de régulateur modèle des boucles de rétrocontrôle de la signalisation MAPK. Une expression dérégulée de **MOS** ou une activité kinase anormale a été associée à une altération des signaux prolifératifs et à des phénotypes de type transformation dans des systèmes expérimentaux, ce qui en fait un élément pertinent pour l’étude de l’architecture de la voie MAPK et des points de contrôle du cycle cellulaire. Ces propriétés font de **MOS** une cible utile pour interroger les réseaux de signalisation pilotés par des kinases ainsi que leurs effets transcriptionnels et cytosquelettiques en aval.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MOS (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MOS dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MOS, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MOS à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MOS.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MOS pour l'étude de la signalisation de MOS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de MOS essentiels à la fonction de MOS
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MOS pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le MOS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le MOS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MOS. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le MOS plasmide HDR (h) et le MOS (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MOS pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MOS définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.