MOB2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-413424

Übersicht

MOB2 (MOB-Kinaseaktivator 2) ist ein konserviertes Adapterprotein, das mit Kinasen der NDR/LATS-Familie interagiert, um Hippo-assoziierte Signalwege zu modulieren, und dadurch Phosphorylierungskaskaden beeinflusst, die Zellproliferation, Apoptose und die Organisation des Zytoskeletts steuern. Durch die Regulation der Kinaseaktivität und der subzellulären Lokalisation von Komponenten des Signalwegs trägt MOB2 zur Kontrolle der Zellzyklusprogression, der Zellpolarität und des kontaktabhängigen Wachstums bei. Fehlregulierte Hippo/NDR-Signale werden häufig mit onkogenen Phänotypen in Verbindung gebracht, und eine veränderte MOB2-Funktion wurde mit Störungen in Tumorsuppressor-Netzwerken und der Kontrolle der Proliferation assoziiert. MOB2 ist daher relevant für die Untersuchung von Mechanismen, die Kinase-Regulation mit Gewebehomöostase und krankheitsassoziiertem Umprogrammieren von Signalwegen verknüpfen.

Das MOB2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MOB2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MOB2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MOB2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MOB2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MOB2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MOB2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MOB2-Exone abzielen, die für die MOB2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MOB2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MOB2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MOB2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MOB2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MOB2 HDR-Plasmid (h) und MOB2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MOB2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MOB2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.