MMS19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405964

概要

MMS19はMMS19タンパク質をコードしており、細胞質における鉄–硫黄（Fe–S）クラスターの組み立てや、DNA複製・修復に関与するFe–S依存性核内タンパク質の成熟化における役割を通じて、ゲノム維持に関与する保存性の高い因子として知られています。複数のDNA代謝酵素の機能的完全性を支えることで、MMS19は複製ストレス耐性、DNA損傷応答シグナル伝達、および全体的な染色体安定性に寄与します。そのため、MMS19の機能異常はゲノム完全性を保護する経路と関連し、遺伝毒性ストレッサーに対する細胞の感受性に影響を及ぼし得ます。MMS19に関連する過程の破綻は、変異蓄積、チェックポイント制御、ならびに疾患関連状況で観察されるゲノム不安定性表現型の基盤となる機構の研究において注目されています。

MMS19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMMS19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MMS19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MMS19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MMS19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MMS19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MMS19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MMS19の機能に不可欠なMMS19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MMS19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MMS19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMMS19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MMS19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MMS19 HDRプラスミド（h）および MMS19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMMS19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMMS19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。