MMP-21 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-414131

Übersicht

MMP21 kodiert die Matrix-Metalloproteinase 21 (MMP-21), eine sekretierte, zinkabhängige Endopeptidase, die zum Umbau der extrazellulären Matrix beiträgt, indem sie Matrix- und Zelloberflächen-Substrate spaltet. Als Teil des MMP-Proteasenetzwerks beeinflusst MMP-21 die perizelluläre Proteolyse, die Dynamik der Basalmembran sowie Zell‑Matrix‑Signalwege, die epithel‑mesenchymale Interaktionen prägen. Diese Aktivitäten überschneiden sich mit Signalwegen, die mit Migrations- und Invasionsprogrammen verknüpft sind, darunter integrinvermittelte Adhäsion, die Bioverfügbarkeit von Wachstumsfaktoren und entzündungsgetriebener Gewebeumbau. Eine veränderte MMP21-Expression wurde in mehreren pathologischen Kontexten beschrieben, in denen ein aberranter Matrixumsatz den Krankheitsverlauf begleitet, was seine Bedeutung als mechanistischer Knotenpunkt in der Matrixbiologie unterstreicht.

Das MMP-21 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MMP21-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MMP21-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MMP21 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MMP-21-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MMP21-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MMP-21-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MMP21-Exone abzielen, die für die MMP-21-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MMP21-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MMP-21 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MMP-21 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MMP21-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MMP-21 HDR-Plasmid (h) und MMP-21 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MMP21-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MMP21-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.