MIZIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426433

概要

Zmynd19は、MYCと相互作用するジンクフィンガー関連タンパク質であるMIZIPをコードしており、細胞の増殖や分化に関わる転写プログラムの制御に関与すると考えられています。MIZIPはMYCとの結合や、ジンクフィンガーを介したと推定されるタンパク質複合体を通じて、増殖、細胞代謝、系譜（ラインेज）決定を協調させる遺伝子発現ネットワークに影響を与えると推測されています。MYCを中心とした転写制御の変化は、がん化や発生に関連する表現型と広く関係するため、Zmynd19は文脈依存的な転写調節を解明するうえで有用な結節点となります。マウス系の実験では、MIZIPを撹乱することで、共調節因子がMYC駆動性経路やその下流の細胞状態をどのように形作るかを明らかにする助けとなります。

MIZIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZmynd19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zmynd19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zmynd19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MIZIPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MIZIPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zmynd19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MIZIPの機能に不可欠なZmynd19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zmynd19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MIZIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMIZIP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zmynd19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MIZIP HDRプラスミド（m）および MIZIP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZmynd19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZmynd19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。