mitochondrial ferritin Double Nickase Plasmid (m): sc-426664-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das mitochondrial ferritin Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- mitochondrial ferritin Double-Nickase-Plasmid (m) und mitochondrial ferritin Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ftmt abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
mitochondrial ferritin Double Nickase Plasmid (m) | sc-426664-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse **Ftmt** kodiert das mitochondriale Ferritin, ein eisenbindendes Protein, das in der mitochondrialen Matrix lokalisiert ist, redoxaktives Eisen puffert und so dazu beiträgt, die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies zu begrenzen. Durch die Speicherung von Eisen in einer ferritinähnlichen Hülle trägt **Ftmt** zur mitochondrialen Eisenhomöostase bei, unterstützt die Integrität der Atmungskette und beeinflusst Signalwege, die mit oxidativen Stressantworten und der mitochondrialen Qualitätskontrolle verknüpft sind. Eine veränderte mitochondriale Eisenhandhabung wurde mit Neurodegeneration, anämieassoziierten Phänotypen und metabolischem Stress in Verbindung gebracht, was **Ftmt** zu einem nützlichen Genort für die Untersuchung der Ferroptose-Empfindlichkeit und mitochondrialer Dysfunktion in Säugerzellen macht. Die **Ftmt**-Expression wird zudem als Readout in Modellen der Eisenüberladung und entzündungsassoziierter Veränderungen im zellulären Eisentransport genutzt.
mitochondrial ferritin Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ftmt-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ftmt abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ftmt-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ftmt-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.