MITF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m2): sc-421654-KO-2

개요

Mitf는 미세안구증 연관 전사인자(microphthalmia-associated transcription factor, MITF)를 암호화하며, MITF는 멜라노사이트와 그와 관련된 신경능선 유래 세포 유형에서 계통 지정과 분화 프로그램을 조율하는 basic helix-loop-helix leucine zipper(bHLH-LZ) 전사 조절자입니다. MITF는 색소 형성, 멜라노좀 생합성, 세포주기 진행, 생존을 관장하는 전사 네트워크를 조절하고, MAPK/ERK 및 cAMP/CREB 경로와 같은 신호 입력을 통합합니다. 생쥐 모델에서 Mitf 활성이 변하면 멜라노사이트 발달, 색소 표현형, 비만세포의 면역 관련 기능에 영향을 미치며, 이를 통해 이 유전자는 멜라닌 생성과 계통 가소성에 대한 기전 연구와 연결됩니다. MITF 의존 프로그램의 조절 이상은 분화 상태 전환과 스트레스 반응을 포함해 흑색종 생물학과 관련된 경로를 탐구하는 데 널리 활용됩니다.

MITF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)는 mouse 세포주에서 Mitf 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Mitf 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Mitf의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MITF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MITF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Mitf 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MITF 기능에 중요한 Mitf 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Mitf 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MITF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MITF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Mitf 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MITF HDR 플라스미드 (m) 및 MITF HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Mitf 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Mitf 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.