MIP-3α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422839
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIP-3α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MIP-3α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIP-3α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422839 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccl20 codifica a quimiocina proteína inflamatória de macrófagos-3 alfa (MIP-3α), um ligante secretado de CCR6 que direciona a quimiotaxia de células dendríticas imaturas, células T de memória e células B para locais de ativação epitelial. Induzida por NF-κB e por citocinas pró-inflamatórias, a CCL20 participa do tráfego de leucócitos, da vigilância imunológica das mucosas e da organização de microambientes inflamatórios. A sinalização CCL20–CCR6 desregulada tem sido associada a processos inflamatórios crônicos e à patobiologia autoimune, sendo frequentemente estudada no contexto de disfunção da barreira epitelial e do recrutamento de células imunes associado a tumores. Em camundongos, Ccl20 fornece um alvo acessível para dissecar a migração celular dirigida por quimiocinas e as redes de citocinas em pesquisas de imunologia e inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MIP-3α (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl20 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl20, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl20 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MIP-3α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl20 para a investigação da sinalização de MIP-3α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl20 críticos para a função MIP-3α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl20 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MIP-3α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MIP-3α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl20. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MIP-3α Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MIP-3α (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl20 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl20 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.