Plasmide Double Nickase (h) MIA2: sc-418205-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MIA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MIA2 Double Nickase (h) et le plasmide MIA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MIA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MIA2 | sc-418205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MIA2 | sc-418205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MIA2 (membre 2 de la famille « melanoma inhibitory activity ») code une grande protéine de la voie sécrétoire, enrichie dans le réticulum endoplasmique et l’appareil de Golgi, qui soutient le trafic intracellulaire et la sécrétion de protéines cargos spécifiques. Elle est impliquée dans l’homéostasie du RE et le traitement des protéines, reliant l’activité de MIA2 à des voies telles que les réponses au stress du RE, le transport médié par des vésicules et la régulation de la signalisation associée à la matrice extracellulaire. Une expression altérée de MIA2 a été rapportée dans plusieurs cancers et pathologies hépatiques, ce qui concorde avec des rôles dans la différenciation tumorale, des modifications du sécrétome liées à l’invasion et le remodelage du tissu hépatique. Ces caractéristiques font de MIA2 une cible utile pour étudier la régulation des réseaux sécrétoires et la façon dont des défauts de trafic influencent les phénotypes cellulaires.
MIA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MIA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MIA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MIA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MIA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.