Plasmide Double Nickase (h) METTL11A: sc-412015-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) METTL11A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide METTL11A Double Nickase (h) et le plasmide METTL11A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NTMT1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) METTL11A | sc-412015-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) METTL11A | sc-412015-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NTMT1 code la méthyltransférase N‑terminale humaine METTL11A, une enzyme dépendante de la SAM qui catalyse la méthylation α‑N des extrémités N‑terminales des protéines après l’élimination de la méthionine initiatrice. Cette méthylation N‑terminale peut influencer les interactions protéine‑protéine, la stabilité et la localisation subcellulaire des protéines, reliant METTL11A à la protéostasie ainsi qu’à la régulation de la signalisation et de processus nucléaires. L’activité de METTL11A s’inscrit dans des réseaux régulateurs plus larges dépendants de la méthylation, notamment des voies associées à la chromatine et à la réponse au stress, via la modulation de substrats méthylés. Une méthylation N‑terminale dérégulée a été associée à des altérations des programmes de croissance et de différenciation cellulaires, faisant de NTMT1 un locus pertinent pour des études mécanistiques des phénotypes induits par la méthylation et du remodelage des voies dans des modèles pertinents pour les maladies.
METTL11A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NTMT1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NTMT1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NTMT1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NTMT1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.