Plasmide Double Nickase (m) METRNL: sc-431669-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) METRNL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide METRNL Double Nickase (m) et le plasmide METRNL Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Metrnl. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) METRNL | sc-431669-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) METRNL | sc-431669-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Metrnl code la météorine‑like (METRNL), une protéine sécrétée et glycosylée impliquée dans la signalisation intercellulaire qui coordonne des programmes métaboliques et inflammatoires. Dans les tissus murins, l’expression de METRNL a été associée au dialogue entre tissu adipeux et système immunitaire, à la modulation de la polarisation des macrophages et à la régulation de l’homéostasie énergétique en réponse à des facteurs de stress physiologiques tels que l’exposition au froid et l’exercice. Parmi les liens fonctionnels rapportés figurent des voies influençant la signalisation des cytokines et le remodelage de la matrice extracellulaire, ce qui fait de METRNL un nœud pertinent pour étudier le métabolisme systémique et l’adaptation tissulaire. Une dérégulation de la signalisation associée à METRNL a été étudiée dans des contextes d’obésité, de résistance à l’insuline et de phénotypes inflammatoires, étayant des recherches mécanistiques sur des voies impliquées dans les maladies métaboliques.
METRNL Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Metrnl dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Metrnl. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Metrnl. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Metrnl.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.