Met Lentiviral Activation Particles (m): sc-421635-LAC

Mouse Met kodiert eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die den Hepatozyten-Wachstumsfaktor (HGF) bindet und dadurch Zellmotilität, Überleben, Proliferation und Morphogenese reguliert. Die Aktivierung von MET löst Signalübertragung über PI3K–AKT-, RAS–MAPK-, STAT-, SRC- und Fokale-Adhäsions-Signalwege aus und koordiniert dabei während Entwicklung und Gewebereparatur den Umbau des Zytoskeletts sowie epitheliale–mesenchymale Dynamiken. Eine fehlregulierte MET-Signalgebung ist an onkogenen Wachstumsprogrammen, Invasion und metastatischer Progression beteiligt und zudem relevant für Fibrose, Neurobiologie und regenerative Antworten. In Mausmodellen wird Met häufig eingesetzt, um das Zusammenspiel von Rezeptor-Tyrosinkinasen, mikroenvironmentale Signale und Signalwegabhängigkeiten in normalen sowie krankheitsassoziierten Kontexten zu untersuchen.

Met Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Met-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Met Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Met-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Met-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Met-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.