Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MEK-4: sc-401459-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MEK-4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MEK-4 Double Nickase (h) et le plasmide MEK-4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAP2K4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MEK-4 Antibody (G-7): sc-376838
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MEK-4 | sc-401459-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MEK-4 | sc-401459-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP2K4 code pour MEK-4 (MKK4), une MAP kinase kinase à double spécificité qui phosphoryle et active les modules de signalisation des MAPK JNK et p38 en réponse au stress cellulaire, à des signaux inflammatoires et à des stimuli développementaux. Par ces voies, MEK-4 régule des programmes transcriptionnels qui contrôlent l’apoptose, la production de cytokines, la différenciation et le remodelage du cytosquelette. L’activité de MAP2K4 s’articule avec les MAP3K en amont et les MAPK en aval pour façonner des réponses dépendantes du contexte dans les cellules épithéliales et immunitaires. La dérégulation de la signalisation MAP2K4 a été associée à des réponses au stress altérées et à la biologie tumorale, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques dans des modèles pertinents pour le cancer et l’inflammation.
MEK-4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAP2K4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAP2K4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAP2K4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAP2K4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.