Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Med22 (m): sc-423222
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Med22 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Med22, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Med22 Antibody (D-10): sc-393738
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Med22 (m) | sc-423222 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Med22 code une sous-unité centrale du complexe Mediator, un corégulateur transcriptionnel conservé qui relie des facteurs de transcription spécifiques de séquence à l’ARN polymérase II. Dans les cellules de souris, MED22 soutient l’assemblage et la fonction du module « head » de Mediator, influençant la transcription dépendante des promoteurs, la dynamique d’initiation et des programmes plus larges d’expression génique liés au développement et à la différenciation. En coordonnant des réponses transcriptionnelles dépendantes des signaux, MED22 contribue à des voies qui gouvernent le contrôle du cycle cellulaire, les réponses au stress et la spécification des lignées cellulaires. La dérégulation des composants de Mediator a été associée à une altération de l’homéostasie transcriptionnelle et à des phénotypes pertinents pour les maladies, faisant de Med22 un nœud utile pour sonder la vulnérabilité des réseaux transcriptionnels.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Med22 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Med22 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Med22, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Med22 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Med22.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Med22 pour l'étude de la signalisation de Med22, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Med22 essentiels à la fonction de Med22
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Med22 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Med22 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Med22 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Med22. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Med22 plasmide HDR (m) et le Med22 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Med22 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Med22 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.