Plasmide Double Nickase (h) MCT3: sc-403973-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MCT3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MCT3 Double Nickase (h) et le plasmide MCT3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC16A8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MCT3 | sc-403973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MCT3 | sc-403973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC16A8 code le transporteur de monocarboxylates 3 (MCT3), un transporteur de solutés couplé aux protons qui assure le transport transmembranaire du lactate et d’autres monocarboxylates, contribuant au maintien de l’homéostasie du pH cellulaire et au couplage métabolique. Dans les tissus oculaires humains, MCT3 est particulièrement exprimé dans l’épithélium pigmentaire rétinien et participe à l’efflux de lactate depuis la rétine externe, reliant le flux glycolytique au métabolisme oxydatif à travers les barrières épithéliales. En tant que membre de la famille SLC16, MCT3 s’inscrit dans des voies plus larges de transport des monocarboxylates et de régulation acido-basique, qui influencent l’équilibre rédox et la signalisation métabolique. Des altérations de la prise en charge des monocarboxylates et une dérégulation du transport du lactate ont été impliquées dans la physiologie rétinienne et dans des processus liés aux maladies, ce qui fait de SLC16A8 une cible utile pour étudier les mécanismes de transport métabolique.
MCT3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC16A8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC16A8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC16A8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC16A8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.