Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MCM7: sc-400900-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MCM7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MCM7 Double Nickase (h) et le plasmide MCM7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MCM7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MCM7 Antibody (141.2): sc-9966
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MCM7 | sc-400900-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MCM7 | sc-400900-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM7 code une sous-unité essentielle de l’hélicase de maintenance des minichromosomes (MCM2–7), qui « autorise » les origines de réplication et assure le déroulement de l’ADN pendant la phase S. En tant que composant du complexe de pré-réplication, MCM7 coordonne son action avec CDC45 et GINS afin de soutenir la progression des fourches de réplication, la stabilité du génome et les réponses des points de contrôle du cycle cellulaire. Une expression dérégulée de MCM7 ou un mauvais contrôle de l’autorisation de la réplication contribue au stress réplicatif, à une prolifération aberrante et à l’instabilité chromosomique observés dans de nombreux types de tumeurs. MCM7 est également étudié dans le cadre de la tolérance aux dommages de l’ADN et de la protéostasie des facteurs de réplication lors de stress induit par des oncogènes.
MCM7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MCM7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MCM7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MCM7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MCM7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.