Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Mcl-1: sc-400079-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mcl-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mcl-1 Double Nickase (h) et le plasmide Mcl-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MCL1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Mcl-1 Antibody (22): sc-12756
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mcl-1 | sc-400079-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Mcl-1 | sc-400079-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCL1 code pour la protéine anti-apoptotique Mcl-1 de la famille BCL-2, un régulateur clé de la perméabilisation de la membrane externe mitochondriale qui freine l'apoptose dépendante de BAX/BAK et favorise la survie cellulaire. Mcl-1 intègre des signaux issus des voies du stress et de la croissance, notamment PI3K–AKT, MAPK/ERK et les réponses intégrées au stress, et est régulée de manière dynamique par la transcription, un renouvellement protéasomal rapide et la phosphorylation. En modulant le seuil apoptotique et l'homéostasie mitochondriale, MCL1 influence le maintien des cellules hématopoïétiques, l'activation des cellules immunitaires et les réponses au stress métabolique et génotoxique. Une expression ou une stabilité dérégulée de MCL1 est fréquemment associée à une apoptose altérée en oncologie, ainsi qu'à des phénotypes de survie cellulaire pertinents dans des contextes de neurodégénérescence et d'inflammation.
Mcl-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MCL1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MCL1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MCL1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MCL1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.