Plasmide Double Nickase (h) MC3-R: sc-403341-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MC3-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MC3-R Double Nickase (h) et le plasmide MC3-R Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MC3R. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MC3-R | sc-403341-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MC3-R | sc-403341-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MC3R code le récepteur de la mélanocortine 3 (MC3-R), un récepteur couplé aux protéines G principalement activé par des peptides mélanocortines tels que l’α‑MSH. MC3-R se couple surtout à Gs pour stimuler l’adénylate cyclase et la signalisation cAMP/PKA, intégrant des signaux neuroendocriniens qui régulent l’homéostasie énergétique, la répartition des nutriments et les comportements liés à la prise alimentaire. Dans les tissus métaboliques et le système nerveux central, la signalisation de MC3-R interagit avec les circuits hypothalamiques qui contrôlent l’appétit et l’équilibre énergétique lié aux rythmes circadiens. Des perturbations génétiques et fonctionnelles de MC3R ont été associées à des phénotypes liés à l’obésité et à une régulation métabolique altérée, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques en métabolisme et en neurobiologie.
MC3-R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MC3R dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MC3R. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MC3R. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MC3R.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.