MBNL1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402194-NIC

MBNL1(근육블라인드 유사 스플라이싱 조절인자 1)은 pre-mRNA에서 YGCY 모티프를 인식하는 RNA 결합 단백질을 암호화하며, 이를 통해 대체 스플라이싱, mRNA의 세포 내 위치 결정, 그리고 안정성을 조절합니다. 또한 근형성, 신경 분화, 조직 특이적 아이소폼 발현의 유지에 중요한 전사 후 유전자 조절 프로그램을 조율합니다. MBNL1은 RNA 처리 및 스플라이소좀 관련 경로에 관여하고, 다양한 전사체에서 발달 단계에 따른 스플라이싱 전환을 확립하는 데 도움을 줍니다. MBNL1의 조절 이상 또는 기능적 격리는 근긴장성 이영양증 및 기타 신경근육계 표현형에서 관찰되는 비정상적 스플라이싱 시그니처와 강하게 연관되어 있어, RNA 처리 이상 메커니즘 연구에서 핵심적인 노드로 간주됩니다.

MBNL1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 MBNL1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 MBNL1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 MBNL1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, MBNL1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.