Plasmide Double Nickase (h) MBLAC1: sc-407281-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MBLAC1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MBLAC1 Double Nickase (h) et le plasmide MBLAC1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MBLAC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MBLAC1 | sc-407281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MBLAC1 | sc-407281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBLAC1 (metallo-β-lactamase domain containing 1) code une hydrolase dépendante du zinc appartenant à la superfamille des métallo-β-lactamases, principalement associée au métabolisme mitochondrial. La protéine a été impliquée dans le traitement de métabolites de petites molécules ou dérivés de nucléotides, contribuant au maintien de l’équilibre rédox mitochondrial et, plus largement, de l’homéostasie énergétique cellulaire. En influençant la fonction mitochondriale, MBLAC1 peut interagir avec les réponses au stress oxydatif et les voies d’adaptation métabolique, souvent perturbées dans des états cellulaires prolifératifs et associés au stress. Des altérations de l’expression ou de l’activité de MBLAC1 ont été étudiées dans le contexte de la dysrégulation métabolique et de phénotypes mitochondriaux pertinents pour la biologie des maladies, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques.
MBLAC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MBLAC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MBLAC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MBLAC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MBLAC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.