MaxiKα Lentiviral Activation Particles (h): sc-402208-LAC

KCNMA1 kodiert die porenbildende α‑Untereinheit des großleitenden, calcium- und spannungsaktivierten Kaliumkanals MaxiKα (BK). Dieser Kanal koppelt intrazelluläre Ca²⁺‑Signale und Membrandepolarisation an den K⁺‑Ausstrom und prägt dadurch die Repolarisation des Aktionspotenzials, die Feuerungsfrequenz und die Nachhyperpolarisation in erregbaren Geweben. Die Aktivität von MaxiKα ist in Ca²⁺‑abhängige Signalwege und Mechanismen der Ionenhomöostase integriert und reguliert so den Tonus glatter Muskulatur, die neuronale Erregbarkeit und Sekretion. Eine fehlregulierte Funktion oder Expression von KCNMA1 wird mit Erkrankungen in Verbindung gebracht, die mit veränderter Erregbarkeit und Kontraktilität einhergehen, darunter neuroentwicklungsbezogene Phänotypen, erhöhte Anfallsanfälligkeit sowie Funktionsstörungen der glatten Gefäß- oder Atemwegsmuskulatur; dies stützt mechanistische Untersuchungen in relevanten zellulären Modellen.

MaxiKα Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente KCNMA1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

MaxiKα Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der KCNMA1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen MaxiKα-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen KCNMA1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.