Plásmido Doble Nickase (h) Max: sc-400596-NIC

El gen humano **MAX** codifica Max, un factor de transcripción básico de tipo hélice–bucle–hélice con cremallera de leucina, que dimeriza con proteínas de la familia MYC para regular programas de expresión génica dependientes de **E-box** que controlan el crecimiento celular, el metabolismo, la biogénesis de ribosomas y la progresión del ciclo celular. Max también forma complejos represores con socios **MXD/MNT**, proporcionando un contrapeso a la activación transcripcional impulsada por MYC y ayudando a mantener la homeostasis transcripcional. A través de estos dímeros activadores y represores dependientes del contexto, MAX actúa dentro de la señalización de la red **MYC/MAX/MAD** y se integra con la regulación de la cromatina para moldear salidas transcripcionales específicas de linaje y de estímulo. La alteración de la actividad de MAX o la disrupción del eje MYC–MAX se ha vinculado con proliferación desregulada y estados transcripcionales oncogénicos, lo que respalda su estudio en biología tumoral, adaptación metabólica y control de la transcripción.

Max El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAX en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAX. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAX. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAX alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.