Matrilin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406830

概要

MATN1はマトリリン1をコードしており、マトリリン1は軟骨に豊富な細胞外マトリックス（ECM）のアダプタータンパク質です。コラーゲンとプロテオグリカンを超分子ネットワークとして連結することで、細胞周囲マトリックスの組織化を助けます。マトリリン1は、骨格形成および軟骨内骨化の過程における軟骨細胞の分化、軟骨の構造的完全性、ならびに細胞外マトリックスの組み立てに寄与します。また、モジュール状のドメイン構造と多量体化を介して、組織のバイオメカニクスや細胞—マトリックス間シグナル伝達に影響するマトリックス再構築プロセスにも関与します。MATN1の発現変動やマトリックス構築の異常は、軟骨変性や、細胞外マトリックス恒常性が破綻する遺伝性または後天性の骨・関節疾患の文脈で研究されています。

Matrilin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMATN1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MATN1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MATN1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Matrilin-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Matrilin-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MATN1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Matrilin-1の機能に不可欠なMATN1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MATN1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Matrilin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMatrilin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MATN1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Matrilin-1 HDRプラスミド（h）および Matrilin-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMATN1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMATN1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。