MASP-1/3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421564

개요

Masp1는 만노스 결합 렉틴(MLB) 연관 세린 프로테아제인 MASP-1과 MASP-3를 암호화하며, 이들은 분비형 효소로서 보체(complement) 렉틴 경로를 조절함으로써 선천면역에 관여합니다. MASP-1/3는 보체 성분을 절단하고 MBL 및 피콜린(ficolin)과 같은 패턴 인식 분자와 협력하여 옵소닌화, 염증성 신호전달, 그리고 보체와 응고 관련 과정 간의 상호작용(crosstalk)에 영향을 미칩니다. 또한 MASP-3는 factor D를 활성화함으로써 대체 경로 조절과도 추가로 연관되어, Masp1은 보체 증폭 과정의 핵심 교차점에 위치합니다. 보체 활성화의 조절 이상 및 MASP-1/3 활성 변화는 염증성 및 자가면역성 표현형과 연관되어 왔으며, 여러 장기 시스템에서 질병과 관련된 조직 손상 기전에 기여합니다.

MASP-1/3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Masp1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Masp1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Masp1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MASP-1/3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MASP-1/3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Masp1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MASP-1/3 기능에 중요한 Masp1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Masp1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MASP-1/3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MASP-1/3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Masp1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MASP-1/3 HDR 플라스미드 (m) 및 MASP-1/3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Masp1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Masp1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.