Plasmide Double Nickase (h) MAGE-C2: sc-405516-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MAGE-C2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAGE-C2 Double Nickase (h) et le plasmide MAGE-C2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAGEC2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MAGE-C2 | sc-405516-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MAGE-C2 | sc-405516-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAGEC2 code la protéine MAGE-C2, un antigène cancer/testis de la famille des MAGE de type I, normalement limité aux cellules germinales mais fréquemment exprimé de façon aberrante dans les tumeurs. MAGE-C2 participe à l’homéostasie des protéines en modulant l’activité des ligases E3 de l’ubiquitine via des interactions avec des partenaires contenant un domaine RING, influençant l’ubiquitination et la dégradation dépendante du protéasome. Par ces voies, MAGE-C2 peut affecter des programmes cellulaires liés aux réponses au stress, à la régulation du cycle cellulaire et à la signalisation de survie. Son profil d’expression associé aux tumeurs et son immunogénicité en font un marqueur largement utilisé pour étudier la biologie des cancers, la présentation d’antigènes et l’adaptation des cellules tumorales.
MAGE-C2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAGEC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAGEC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAGEC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAGEC2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.