Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO MAF1 (m): sc-427213
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- MAF1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique MAF1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MAF1 Antibody (H-2): sc-515614
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO MAF1 (m) | sc-427213 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Maf1 code pour MAF1, un répresseur transcriptionnel conservé qui module l’activité de l’ARN polymérase III et coordonne la biosynthèse avec les signaux nutritifs et de stress. Dans les cellules de souris, l’activité de MAF1 intègre TORC1/mTOR et d’autres voies de kinases afin de contrôler la transcription des ARNt et de l’ARNr 5S, reliant l’état métabolique à la protéostasie et à la croissance cellulaire. En régulant la transcription dépendante de Pol III, MAF1 influence la prolifération, les réponses au stress cellulaire et les programmes d’homéostasie énergétique. Le dérèglement du contrôle de Pol III et des voies de signalisation métabolique a été associé à des phénotypes de croissance altérés et à des processus liés aux maladies, faisant de Maf1 un point d’entrée utile pour des études mécanistiques sur le métabolisme, l’adaptation au stress et le contrôle de la croissance.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO MAF1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Maf1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Maf1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Maf1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine MAF1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Maf1 pour l'étude de la signalisation de MAF1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Maf1 essentiels à la fonction de MAF1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Maf1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le MAF1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le MAF1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Maf1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le MAF1 plasmide HDR (m) et le MAF1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Maf1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Maf1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.