Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Mad 1 (m): sc-421519
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Mad 1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Mad 1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Mad 1 Antibody (F-1): sc-8012
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Mad 1 (m) | sc-421519 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Mxd1 (Mad1) code un régulateur transcriptionnel de type hélice-boucle-hélice basique à fermeture éclair leucine, qui antagonise l’expression génique pilotée par MYC en s’associant à MAX et en recrutant des complexes corépresseurs. Via ce réseau MYC–MAX–MAD, Mad1 contribue à des programmes de répression transcriptionnelle qui contrôlent la progression du cycle cellulaire, la différenciation et le métabolisme cellulaire. Dans les modèles murins, l’altération de l’activité de Mxd1 est étudiée dans des contextes où la signalisation MYC est dérégulée, notamment la transformation oncogénique, des phénotypes hématopoïétiques et l’organisation du développement. La régulation, dépendante de Mad1, de la chromatine et de l’activité de l’ARN polymérase II en fait un nœud utile pour disséquer les états transcriptionnels prolifératifs versus différenciatifs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Mad 1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Mxd1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Mxd1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Mxd1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Mad 1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Mxd1 pour l'étude de la signalisation de Mad 1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Mxd1 essentiels à la fonction de Mad 1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Mxd1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Mad 1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Mad 1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Mxd1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Mad 1 plasmide HDR (m) et le Mad 1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Mxd1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Mxd1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.