Plasmide Double Nickase (h) Mac-2BP: sc-403108-NIC

LGALS3BP code Mac-2BP (protéine de liaison à la galectine-3), une glycoprotéine sécrétée et associée à la matrice extracellulaire, qui module les interactions cellule–cellule et cellule–matrice via des partenaires de liaison tels que les galectines et les intégrines. Mac-2BP est impliquée dans l’adhérence, la migration, la modulation immunitaire et le remodelage du milieu extracellulaire, avec des effets en aval sur la signalisation inflammatoire et la communication tumeur–stroma. Une expression altérée de LGALS3BP a été rapportée dans de multiples contextes cancéreux et fibrosants/inflammatoires, et est fréquemment évaluée comme composante liée à des biomarqueurs au sein des sécrétomes associés aux maladies. Ces caractéristiques font de LGALS3BP une cible utile pour étudier la régulation du microenvironnement, le dialogue immuno‑épithélial et les voies pertinentes pour la métastase dans des modèles cellulaires humains.

Mac-2BP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LGALS3BP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LGALS3BP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LGALS3BP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LGALS3BP.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.