Plasmide Double Nickase (m) M-CSF: sc-419838-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) M-CSF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide M-CSF Double Nickase (m) et le plasmide M-CSF Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Csf1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: M-CSF Antibody (D-4): sc-365779
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) M-CSF | sc-419838-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le facteur 1 stimulant les colonies (Csf1) code le macrophage colony-stimulating factor (M-CSF), une cytokine sécrétée qui contrôle la survie, la prolifération et la différenciation des cellules de la lignée monocyte/macrophage via la signalisation du récepteur CSF1R. Le M-CSF active en aval les voies PI3K–AKT, MAPK/ERK et JAK/STAT, contribuant à l’homéostasie de l’immunité innée, à l’ostéoclastogenèse et au remodelage tissulaire. Dans les systèmes murins, une activité Csf1/M-CSF altérée est étroitement associée à un développement myéloïde dérégulé, à des microenvironnements inflammatoires et à des phénotypes de remodelage osseux, ce qui en fait un nœud central pour l’étude de la biologie des macrophages. Ces processus sont fréquemment exploités dans des modèles d’inflammation chronique, de neuroinflammation et de dynamique microgliale, ainsi que de polarisation des macrophages associés aux tumeurs, sans implication de résultats thérapeutiques.
M-CSF Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Csf1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Csf1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Csf1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Csf1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.