Plasmide Double Nickase (h) LYPLA2: sc-405133-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LYPLA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LYPLA2 Double Nickase (h) et le plasmide LYPLA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LYPLA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LYPLA2 Antibody (B-12): sc-390546
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LYPLA2 | sc-405133-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **LYPLA2** code la lysophospholipase II, une hydrolase à sérine qui désacyle les lysophospholipides et participe au remodelage des lipides membranaires ainsi qu’au métabolisme des glycérophospholipides. En régulant le renouvellement des acyles gras et les réservoirs de signalisation des lysophospholipides, LYPLA2 influence la dynamique des membranes d’organites, le trafic vésiculaire et les réponses au stress cellulaire. Une homéostasie phospholipidique altérée est associée à l’inflammation, aux dysfonctionnements métaboliques et à des phénotypes prolifératifs, faisant de LYPLA2 un nœud pertinent pour l’étude des voies dépendantes des lipides et de la régulation de l’état cellulaire. L’activité de LYPLA2 est donc importante pour les travaux portant sur les réseaux de signalisation des lipides bioactifs et sur les mécanismes reliant la composition membranaire à la physiologie cellulaire.
LYPLA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LYPLA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LYPLA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LYPLA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LYPLA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.