Plasmide Double Nickase (h) LTK: sc-405150-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LTK correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LTK Double Nickase (h) et le plasmide LTK Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LTK. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LTK Antibody (B-6): sc-393465
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LTK | sc-405150-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LTK | sc-405150-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La tyrosine kinase réceptrice des leucocytes (LTK) est une tyrosine kinase réceptrice qui régule des programmes de transduction du signal contrôlant la croissance, la survie et la différenciation cellulaires, via le recrutement d’effecteurs en aval dépendant de la phosphorylation. L’activité de LTK s’interface avec des voies kinasiques canoniques telles que la signalisation MAPK/ERK, PI3K–AKT et JAK/STAT, modulant de manière contextuelle les sorties transcriptionnelles et la dynamique du cytosquelette. Une signalisation dérégulée des tyrosine kinases réceptrices, incluant une expression ou une activation aberrante de LTK, est impliquée dans des réseaux de signalisation oncogéniques et dans des transitions anormales d’états cellulaires. En conséquence, LTK est fréquemment étudiée pour sa contribution au câblage des voies, au remodelage du phosphoprotéome et aux relations génotype–phénotype dans des modèles pertinents pour les maladies.
LTK Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LTK dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LTK. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LTK. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LTK.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.