Plasmide Double Nickase (h) LTA4H: sc-404695-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LTA4H correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LTA4H Double Nickase (h) et le plasmide LTA4H Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LTA4H. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LTA4H Antibody (D-6): sc-390567
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LTA4H | sc-404695-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) LTA4H | sc-404695-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La LTA4H humaine (hydrolase du leucotriène A4) est une métallœnzyme au zinc bifonctionnelle qui convertit le leucotriène A4 en leucotriène B4, un puissant médiateur lipidique qui amplifie la chimiotaxie, la signalisation des cytokines et l’activation de l’immunité innée. Via la voie de biosynthèse de l’acide arachidonique et des leucotriènes, la LTA4H module le recrutement des cellules inflammatoires et contribue à l’équilibre entre les réponses pro‑résolutives et pro‑inflammatoires. Une activité de la LTA4H et une signalisation du LTB4 dérégulées ont été impliquées dans des affections inflammatoires chroniques et des lésions tissulaires médiées par le système immunitaire, et sont fréquemment étudiées dans le contexte de l’inflammation pulmonaire, cardiovasculaire et métabolique. En tant qu’enzyme cytosolique aux effets étendus sur le comportement des leucocytes, la LTA4H constitue un nœud utile pour disséquer les réseaux de signalisation pilotés par les eicosanoïdes et les phénotypes liés à l’inflammation dans des modèles cellulaires humains.
LTA4H Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LTA4H dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LTA4H. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LTA4H. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LTA4H.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.